廖雲珍 葉曉光(guāng) 于憲 2005-12-13 13:50:25 中華實用(yòng)醫(yī)藥雜(zá)志(zhì) 2003年(nián)3月(yuè)第3卷第6期

  【摘要(yào)】 目的(de) 了(le)解血清乙肝病毒表面抗原和(hé<↕)抗體(tǐ)（HBsAg和(hé)抗HBs）同時(shí)陽性的(de)特征。方法 采用(yòng)微(wēi)粒子(zǐ)酶≥•免疫分(fēn)析技(jì)術(shù)測定Ω≤≠∏3502例HBsAg陽性病例的(de)血清HBsAg、抗HBs、乙肝病毒e抗原及其e抗體(tǐ)（HBeAg、抗HBe），并分(fēn)析相(xiàng)關乙肝病毒（HBV）血清标志(zhì)物(wù)模式。結果3502例HBsAg陽性血清中，有(yǒu)92例（2.63%）HBsAg和(hé)抗HBs同時(shí)陽性。這(zhè)92例中HBeAg陽性占52.17%（48/92），抗HBe陽性占42.39%（39/92）。抗HBs和(hé)HBsAg同時(shí)陽性可(kě)發生(shē✔​ng)于HBV感染的(de)不(bù)同臨床類型患者的(de)血清中。結論 HBsAg陽性者即使有(yǒu)抗HBs的(de)存在，也(yě)需要(yào)密切觀察。

 關鍵詞 乙肝表面抗原 乙肝表面抗體(tǐ) 免疫酶技(j₩♦•±ì)術(shù)

乙型肝炎病毒血清學标志(zhì)物(wù)顯示模式及其檢測是(shì)目≥≠前臨床分(fēn)析和(hé)判斷乙肝患者病情、傳染性大(d≤σφà)小(xiǎo)和(hé)療效分(fēn)析的(de)主要(yào)依據之 ↑₽一(yī)，我們嘗試應用(yòng)靈敏度和(hé)準确度較高™>>(gāo)的(de)ABˉBOTT檢測系統定量檢測HBV血清标志(zhì)物(wù)，以尋找其中的(de)✘γ規律，為(wèi)臨床處理(lǐ)乙型病毒性肝炎提供較為(wèi)準确∞¥∞$的(de)依據。我們在檢測3502例HBV感染者中發現(xiàn)有(yǒu)多(duō)種不(bù)同的(de)血清學标志✘> (zhì)模式，其中發現(xiàn)92例HBsAg與抗HBs同時(shí)陽性特殊血清學模式，現(xiàn)就(jiù)此進行(xíng)分(fēn)析。​♠

1 資料與方法

1.1 病例選擇對(duì)自(zì)2001年(nián)2月(yuè)～2002年(nián)11月(yuè)我科(kē)門(mén)診及住院乙肝患者的(d>★e)血清樣本共3502例，在檢出HBsAg陽性的(de)同時(shí)檢測抗HBs，共檢出HBsAg/抗HBs同時(shí)陽性者92例，其中男(nán)51例，女(nǚ)41例，年(nián)齡5～72歲。其中13例為(wèi)住院患者，均有(yǒu)反複肝功能(néng)§≠"異常病史。除3例尚有(yǒu)HDsAg陽性外(wài)，其餘患者甲、丙、丁、戊、庚型标志(zhì)均陰性，并已排除酒精性、藥™×物(wù)性、中毒性肝炎及脂肪肝。診斷符合2000年(nián)西(xī)安第十次全國(gu₽♦¥±ó)病毒性肝炎學術(shù)會(huì)議(yì)修訂的(d€<★e)病毒性肝炎的(de)診斷分(fēn)型标準。

1.2 實驗方法

1.2.1 标本收集 抽晨空(kōng)腹靜(jìng)脈血3ml，分(fēn)離(lí)血清後于當天進行(xíng)HBV血清學檢測。

1.2.2 HBV血清标志(zhì)物(wù)的(de)檢測 采用(yòng)美(měi)國(guó)Abbott公司生(shēng)産的(de)AxSyM全自(zì)動免疫熒光(guāng)分(fēn)析儀及配套Abbott試劑，檢測HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe四個(gè)項目，均采用(yòng)微(wēi)粒子(zǐ)酶免×∏疫分(fēn)析法（MEIA）檢測，操作(zuò)及質控均按試劑藥盒操作(zuò)說(shuō)明(míng)規範進行(xín÷¶‌←g)。HBV-DNA檢測應用(yòng)熒光(guāng)定量PCR法，>1.0E3copy/ml為(wèi)陽性。

2 結果

3502例在檢出HBsAg陽性的(de)同時(shí)檢測抗HBs，有(yǒu)92例（2.63%）在同一(yī)份血清樣本中抗HBs和(hé)HBsAg同時(shí)陽性，HBsAg和(hé)抗HBs同時(shí)陽性的(de)血清學模式有(yǒu)3種，見(jiàn)表1。其中12例患者在不(bù)同時(shí)間(jiān)采血均獲相(xiàng)同的★©'(de)模式（即一(yī)個(gè)患者多(duō)次均檢出HBsAg和(hé)抗HBs同時(shí)陽性）。

表1 92例HBsAg和(hé)抗HBs同時(shí)陽性的(de)血清學模式 （略）

92例中有(yǒu)住院患者13例，男(nán)12例，女(nǚ)1例，患乙型肝炎的(de)病程1～26年(nián)，乙型病毒性肝炎慢(màn)性輕度4例，慢(màn)性中度2例，慢(màn)性中度重疊丁型肝炎病毒感染3例，乙肝後肝硬化(huà)肝功能(néng)失代償期2例，肝硬化(huà)惡變2例，均伴有(yǒu)不(bù)同程度的(de)肝功能(♦"néng)異常。

92例中有(yǒu)9例進行(xíng)HBV-DNA（PCR）檢測，發現(xiàn)有(yǒu)5例HBV-DNA呈陽性。

92例中有(yǒu)6例為(wèi)全程乙肝疫苗接種者。

3 討(tǎo)論

傳統觀點認為(wèi)，HBV感染後抗HBs的(de)出現(xiàn)是(shì)HBV被宿主清除的(de)保護性标志(zhì)，此時(shí)的(d‍πα₩e)血清沒有(yǒu)傳染性，換言之，HBV現(xiàn)行(xíng)感染與抗HBs是(shì)相(xiàng)互排斥的(de)。但(dàn)近(jìn)年(nián)的(π₹de)文(wén)獻報(bào)道(dào)抗HBs可(kě)以單獨 ［1，2］和(hé)（或）HBsAg同時(shí) ［3］ 存在于HBV感染相(xiàng)關的(de)慢(màn)性肝病患者血清Ω♦中，這(zhè)些(xiē)患者體(tǐ)內(nèi)可(kě)®®₹&以有(yǒu)HBV存在和(hé)複制(zhì)。本組檢測結果表明(≤£←míng)，HBsAg陽性的(de)3502病例中，2.63%同時(shí)用(yòng)微(wēi)粒子(zǐ)免疫熒光(guā$λ£×ng)分(fēn)析技(jì)術(shù)試驗可(kě)測得(de)抗HBs陽性，這(zhè)一(yī)百分(fēn)比主要(yào)取決于抗HBs試驗的(de)靈敏度和(hé)特異性，因為(wèi)部分 α(fēn)抗HBs處于臨界值，可(kě)能(néng)部分(fēn)抗HBs反應是(shì)非特異性的(de)，或者可(kě)能(néng)是(shì)HBsAg-抗HBs動态平衡階段（在HBV-M模式的(de)轉換過程中）。然而，有(yǒu)些(xiē)病例在不(bù)同時( ™β₽shí)期采血重複此試驗仍能(néng)測得(de)陽性，且抗HBs水(shuǐ)平也(yě)較高(gāo)，提示抗HBs确實與HBsAg同時(shí)存在。研究證實［4］ 同時(shí)出現(xiàn)HBsAg/抗HBs陽性者，HBsAg和(hé)抗HBs的(de)亞型不(bù)同，為(wèi)同時(shí)或‍↔<相(xiàng)繼被不(bù)同的(de)HBV亞型感染。此時(shí)，抗HBs僅能(néng)中和(hé)同型血清中的(de)病毒。本研究中，少(shǎo)§®↓部分(fēn)慢(màn)乙肝患者在病程的(de)前幾β∏α年(nián)為(wèi)HBsAg陽性，近(jìn)幾年(nián)出現(xiàn)HBsAg/抗HBs同時(shí)陽性，這(zhè)種現(xiàn)象的(de)發生(shēng)<​✔可(kě)能(néng)由于HBV具有(yǒu)高(gāo)度變異性，前S/S區(qū)基因發生(shēng)變異，引起HBsAg“a”決定簇的(de)抗原性免疫原性發生(shēng)改變，使野毒株産生(shēng)的(de)₹ 抗HBs與變異的(de)HBsAg的(de)結合力下(xià)降。從(cóng)而導緻兩者共存。'©₩ Wang等 ［5］ 發現(xiàn)，HBˉsAg/抗HBs共存時(shí)有(yǒu)前S/S基因多(duō)個(gè)點突變和(hé)少(shǎo)量缺失↓‌，尤其是(shì)“a”決定簇變異導緻野毒株第126位異亮(liàng)氨酸變為(wèi)天門(mén)冬酰胺。本組資料中部分(fēn)病例為β↔(wèi)HBV慢(màn)性感染者，同時(shí)存在HBsAg和(hé)抗HBs，甚至是(shì)高(gāo)度感染，因為(wèi)49/92例被測得(de)HBeAg陽性，說(shuō)明(míng)肝細胞中的(de)病毒複制>♦↕(zhì)仍可(kě)持續，因此，抗HBs的(de)出現(xiàn)并不(bù)能(nén ✔‍&g)标志(zhì)HBV複制(zhì)的(de)停止。有(yǒu)9例測HBV-DNA（定量PCR法），其中5例呈陽性，也(yě)進一(yī)步說(shuō)明(míng)HBV複制(zhì)活躍。

本組資料中，6例HBsAg/抗HBs同時(shí)陽性者發生(shēng)于接種乙型肝炎疫苗後，他(tā)們在接種乙肝疫苗前γ&  用(yòng)酶聯免疫法檢測僅抗HBc是(shì)陽性的(de)，全程免疫接種後HBsAg/抗HBs同時(shí)陽性，考慮該部分(fēn)人(rén)既往有(yǒu)HBV感染或血清HBsAg低(dī)水(shuǐ)平存在，普通(tōng ∑)檢測手段不(bù)能(néng)測出，接種疫¥÷♥≤苗後，在宿主免疫壓力下(xià)，發生(shēng)變異株感染。Lee等 ［6］ 報(bào)道(dào)了(le)接種乙×π≠ 型肝炎疫苗後出現(xiàn)HBsAg肽G145R的(de)逃逸變異。

從(cóng)本文(wén)13例住院病人(rén)中可(kě)見(jiàn)血清HBsAg/抗HBs同時(shí)陽性可(kě)發生(shēng)于慢(màn)性HBV感染的(de)不(bù)同臨床類型的(de)病例中，基因變異與病情變化(huà)如(✘♠¶♠rú)慢(màn)性化(huà)、重症化(huà)甚至發生(shēng)癌變的(de)臨床關系，‍>γ需要(yào)更大(dà)樣本的(de)臨床資料進一(yī)步來&¥↑(lái)觀察。我們認為(wèi)，慢(màn)性乙型肝炎患者血清中任何HBV抗體(tǐ)的(de)出現(xiàn)都(dōu)提示并不(bù)意味HBV存在和(hé)複制(zhì)的(de)停止，在臨床上(shàng)需要(yào)密切的(de)動态₽≠‍∑觀察。

 參考文(wén)獻

1 Kaneko S，Miller RH，Feinstone SM，et al.Detection of serumhπ‌epatitis B virus DNA in patients with chronic δ®↔hepatitis using the polymerase chain reaction as→≤∑say.Proc Natl Acad Sci USA，1989，86:312-316.

2 Liang TJ，Baruch Y，Ben-Porath E，et al.Hepatitis B virus infect←₹ion in patients with idio×↑≥¶pathic liver disease.Hepatology，1991，13:1044-1051.

3 Yamamoto K，Horikita M，Tsuda F，et al.Naturally occur♦★εring escape muˉtants of hepatitis B virus with va✔↕rious mutations in the S gene in carriers serop§↕≤≈ositive for antibody to ≠♣"♥hepatitis B surface antigen.J virol，1994，68:2671-2676.

4 李夢東(dōng).實用(yòng)傳染病學，第二版.北(běi)京:人(rén)民(mín)衛生(shēng)出版社，1998，104.

5 Wang YM，Ng WC，Lo SK，et al.