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血清學檢測在豬傳染病防控中的(de)應用(yòn♥≠g)

[ 更新時(shí)間(jiān)：2013-08-16 ]

血清學檢測在豬傳染病防控中的(de)應用(yòng)

血清學檢測就(jiù)是(shì)根據豬群規模，在特定• $的(de)時(shí)期對(duì)各階段豬群按比例采集血清樣品，在實驗室γ £利用(yòng)标準化(huà)檢測試劑盒，檢測樣品的(de)血≠®↑清抗體(tǐ)滴度，并采用(yòng)科(kē)學的(de)方€φ↓法分(fēn)析豬群疫病的(de)流行(xíng)規律以及動态學過程，評價豬"¶'©群免疫狀态，為(wèi)豬場(chǎng)管理(lǐ)者提供數♠"(shù)字化(huà)的(de)信息，科(kē)學防控豬傳染病。

1 血清學檢測的(de)目的(de)

1.1 引進新豬群

在引進新豬群之前，進行(xíng)群體(tǐ)血清學檢測，避免引Ω≠☆入陽性帶毒個(gè)體(tǐ)。

1.2 預測免疫接種時(shí)間(jiān)

在豬病防控中，恰當的(de)免疫接種時(shí)間(ji↕ €©ān)往往是(shì)有(yǒu)效免疫的(de)關鍵，使用(yòng)疫苗尤其是(sh<♥★ì)活苗的(de)時(shí)候，一(yī)定要(yào)考慮母源&® 抗體(tǐ)的(de)影(yǐng)響，最可(kě)÷‍靠和(hé)可(kě)行(xíng)的(de)方法就(jλ↕ iù)是(shì)通(tōng)過血清學方法來(lái)測

定母源抗體(tǐ)的(de)消長(cháng)，确定免疫接種的(de)最佳時(shí)機(jī)≠¥。首次免疫接種時(shí)抗體(tǐ)的(de)轉陽率與ELISA抗體(tǐ)的(dγ∞✔¶e)阻斷率呈明(míng)顯的(de)負相(xiàng)關，即免™•疫前抗體(tǐ)水(shuǐ)平越高(gāo)γΩ✘(體(tǐ)現(xiàn)為(wèi)阻斷率的(de)上(shàn₽‌↑g)升)，免疫效果越差。當母源抗體(tǐ)的(de)阻斷 π ↑率高(gāo)于70％時(shí)，免疫很(h&↓ěn)難奏效。

1.3 疫苗效果的(de)評價

疫苗生(shēng)産廠(chǎng)家(jiā)繁多(duō)，質量參差不(b♣αù)齊，疫苗的(de)運輸、管理(lǐ)♣λ、保存、注射等諸多(duō)環節都(dōu‌¶Ω☆)會(huì)影(yǐng)響疫苗的(de)效力，通(tōng)過血清學檢測可(kě)以了(lδ‍∞✘e)解免疫注射後豬群體(tǐ)內(nèi)是(shì)否産生(shēng)保持抵抗

豬病強毒攻擊的(de)有(yǒu)效抗體(tδ♠€ ǐ)，從(cóng)而科(kē)學合理(¶÷>lǐ)地(dì)做(zuò)好(hǎo)免疫。

1.4 分(fēn)析疫病發生(shēng)的(d☆δ₩e)動态

通(tōng)過定期的(de)分(fēn)階段、分(fēn) Ω✘↓群體(tǐ)血清學檢測能(néng)掌握疫病的(de)發展動态 ₹，比如(rú)可(kě)以了(le)解在種豬群中藍(lán)耳病是(shì‍←€ )否處于“穩定狀态”、是(shì)否存在先天性感染和(hé)✘☆₹✘早期感染、生(shēng)長(cháng)育肥文(wén)章(zhā↔≥ng)編号：1004—5090(2013)02—0024&mdasΩ♦h;02豬在什(shén)麽時(shí)間(jiān)感染藍(lán)耳病、藍(lán)耳病∞&是(shì)否和(hé)喘氣病同時(shí)發

生(shēng)，從(cóng)而在敏感時‌♣≤σ(shí)期采取特定的(de)幹預措施，以避免或降©×ε>低(dī)疫病造成的(de)損失。

1.5 疫病的(de)診斷

雖然血清學檢測能(néng)成功地(dì)用(yòng)于免疫評估，但(dàn)也(yě)有(yǒ₩₽×€u)一(yī)些(xiē)直接檢測抗原或能(néng)夠區(♦φ✔qū)分(fēn)野毒和(hé)免疫抗體(tǐ)的(de)方法，如(rú)herdchek豬 ≤€瘟抗原ELISA試劑盒、CHEKIT豬瘟抗原試劑盒ε‍等能(néng)夠直接檢測到(dào)豬瘟病毒的(de)抗原α₹©成分(fēn)，豬僞狂犬病病毒gI抗體(tǐ)試劑₽π✘≠盒、CHEKIT口蹄疫3ABC抗體(tǐ)試劑盒等能(néng§&)夠将免疫抗體(tǐ)和(hé)野毒抗體(tǐ)™∞≈α很(hěn)好(hǎo)區(qū)分(fēn)。另外™↓(wài)，雖然有(yǒu)一(yī)些(xiē)方法既可(kě)以檢測到(dào)免疫抗體(t↔∏™∏ǐ)和(hé)感染抗體(tǐ)，但(dàn)由于多(duō)數(shù)情況下(xi&₹≤&à)野毒抗體(tǐ)與免疫抗體(tǐ)往£往在滴度或特性上(shàng)存在區(qū)别差别，

所以也(yě)可(kě)以提示養殖者是(shì)否存在野毒感染，如(rú)在使用(yòng¥≠)Herdchek豬瘟抗體(tǐ)試劑盒來(lái)檢測血清抗體(tǐ)時(shí)，研究 ¥者發現(xiàn)，将阻斷率在70％以上(shàng)的(de)血清β進一(yī)步稀釋到(dào)40倍，免疫血清大(dà)多(duō)會(h¶∏uì)呈現(xiàn)陰性結果，而多(duō)數(shù)人(rén)工(gōng¥$)感染豬隻的(de)血清則仍然呈現(xiàn)陽性結果。

1.6 考察豬群的(de)動态學變化(huà)

豬場(chǎng)的(de)生(shēng)産總是(shì)存在波動，如(rú)果<δ≠¶豬場(chǎng)有(yǒu)生(shēng)産正常時(shí)的(de)血清學檢測資料，‍§δ₹再将生(shēng)産異常時(shí)的(de)資料•'↑₽與常規資料檔案進行(xíng)對(duì)比，很(h∞>±ěn)容易查到(dào)出現(xiàn)問(wèn)題的(de)原£±因。另外(wài)如(rú)果在豬群發病時(shí)分(☆>fēn)别采取發病期和(hé)恢複期的(de)λ→血清，通(tōng)過分(fēn)析抗體(tǐ)滴度的(de)變化(huà)，也(yě×ε →)有(yǒu)利于進行(xíng)疫病的(de)診斷與™σγ分(fēn)析。

1.7 疫病的(de)淨化(huà)

血清學檢測用(yòng)于疫病淨化(huà)★←<δ的(de)經典案例是(shì)僞狂犬病。由于gE基因缺失疫苗的(de)應用(yò∏≈ng)使得(de)我們可(kě)以通(tōng∑→£®)過血清學方法區(qū)分(fēn)疫苗注射動物(wù)和(hé)野毒感染動±¶物(wù)，通(tōng)過與gE基因缺失疫苗配套的(de)g ↑E—ELISA試劑盒的(de‌←)檢測與分(fēn)析，科(kē)學指導豬場(chǎng)≤₽↑僞狂犬病的(de)淨化(huà)過程，歐盟許多(duō)國(guó)家(jiā)以 ™及美(měi)國(guó)僞狂犬病的(de)淨化(huà)已經取得(d<♠e)成功，在中國(guó)同樣有(yǒu)許多(duō)豬場(chǎn♠↓g)也(yě)獲得(de)成功。另外(wài)口蹄疫也(yě)可(k→"ě)以通(tōng)過非結構蛋白(bái≤≈)ELISA方法區(qū)分(fēn)野毒感染動物(wù)和(hé)疫苗注射動σ≤物(wù)，這(zhè)極大(dà)方便了(le)豬場♦÷'(chǎng)的(de)診斷和(hé)流行(xíng)病學分(fēn)析。

2 血清學檢測采樣與送檢方法

2.1 采樣分(fēn)組

通(tōng)常采樣應包括種豬群和(hé)生(shēng)長(cháng)豬群。種豬群應包¶♥®括公豬、不(bù)同胎次的(de)經産母豬 ✔♦以及已經選育的(de)後備豬。生(shēng)長(ch∑♣↕∞áng)豬根據周齡不(bù)同可(kě)分(fēn)為(♦★♦wèi)6～7組，每組間(jiān)隔3～4 W，根據檢測疫病的(de)↕✔種類不(bù)同應有(yǒu)所調整，比如(rú)對(duì)于藍(lán)耳病、僞狂犬病、豬瘟∑Ω等可(kě)分(fēn)别采集4、7、10、13、l6、20、24周齡生(♥♣shēng)長(cháng)豬的(de)血清樣品。

2.2 采樣數(shù)量

采樣數(shù)量與豬群的(de)規模大(dà)小(xiǎo)相(xiàng)關，通(tōng'÷)常是(shì)以基礎生(shēng)産母豬$σ‍的(de)數(shù)量來(lái)确定。一(yī)般按>λ基礎生(shēng)産母豬數(shù)量的(de)10％～15％抽樣∑♥λ，進行(xíng)血清學檢測。

2.3 器(qì)材

為(wèi)便于血清學檢測，應準備一(yī)些(xiē)基本的(de•★)器(qì)材，比如(rú)低(dī)速離(lí)心機(jī)、一(yī)次性注射器(qì‌β)、記号筆(bǐ)、無菌試管、1．5 mγ∏l離(lí)心管、泡沫箱、冰袋等。

2.4 采樣方法

豬血清樣品的(de)采集通(tōng)常選用(yòng)頸靜(jìng)∏ ×₩脈、前腔靜(jìng)脈，也(yě)可(kě)選耳靜(jìng)脈。用(y®ε€☆òng)一(yī)次性注射器(qì)無菌采血3 ml～5ml，置無菌試管中擺成斜面•☆Ω，室溫下(xià)靜(jìng)置2～4 h(防止陽光(guān★∞ >g)曝曬)，待血清充

分(fēn)析出後，或離(lí)心分(fēn)σ離(lí)血清，用(yòng)無菌注射器(qì)吸出血清✘₩，注入滅菌離(lí)心管中，蓋緊離(lí)心管蓋，通(♣≤"tōng)常情況下(xià)進行(xíng)常規的(de)檢測每份血清樣品總量應不(b≈ ù)少(shǎo)于1 ml。

2.5 樣品的(de)記錄應盡量詳細

送往實驗室的(de)樣品應有(yǒu)一(yī)式二份的(de‍φ)送檢報(bào)告，一(yī)份随樣品送實驗室，另一(yī)份留存備案。樣品記錄應包括以下(γ $₽xià)內(nèi)容：豬場(chǎng)的(de)名稱地(dì)址；飼養品種及其數(shù)量；∞ ¥飼養方式、是(shì)否自(zì)繁自(zì)養、斷奶日(rì™σ)齡、各個(gè)豬群的(de)免疫程序和(hé)免疫日(rì)期、所用(≥÷∞yòng)疫苗的(de)種類以及是(shì)否發病及✔"¥±用(yòng)藥情況等。

2.6 血清樣品的(de)運送

血清樣品必須在24 h內(nèi)放(f'γ₽àng)在4℃左右的(de)容器(qì)中送到(dào)實驗室，24 h內(nèi)不(bù÷↔')能(néng)送到(dào)實驗室的(de)，需要(yào)在運送過程中保持樣品溫度處₹♥φ于一(yī)20"C以下(xià)，這(zhè)樣才能(•®♥≈néng)保證檢測結果的(de)準确。

本文(wén)內(nèi)容摘自(zì)《河(hé)南(nán)畜牧獸醫(yī)&¶♠↔nbsp;2013年(nián)（第34卷）第2期》

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