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膠體(tǐ)金(jīn)法

[ 更新時(shí)間(jiān):2014-05-08 ]
膠體(tǐ)金(jīn)法

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膠體(tǐ)金(jīn)是(shì)由氯金(jīn)酸(HAuCl4)在還(hái)原劑如(rú)白(bái)磷、抗壞血酸、枸橼酸鈉、鞣酸等作(zuò)用(yòng)下(xià),可(kě)聚合成一(yī)定✔♦< 大(dà)小(xiǎo)的(de)金(jīn)顆粒,并由于靜(j≥✔ìng)電(diàn)作(zuò)用(yòng)成為(wèi)一​©★(yī)種穩定的(de)膠體(tǐ)狀态,形成帶負電(diàn)的(de)疏水(shuǐ)膠←←←δ溶液,由于靜(jìng)電(diàn)作(zuò)用(yòng)而成為(w€≥™èi)穩定的(de)膠體(tǐ)狀态,故稱膠體(tǐ)金(jīn)。

目錄

1簡介

2功能(néng)

 
 

1簡介編輯

膠體(tǐ)金(jīn)在弱堿環境下(xià)帶負電(diàn)荷,可(kě)與蛋白(bái)質分(fēn)子(zǐ)的(de)正電(diàn)荷基團形成牢固的(de)結合,由于這(zhè)種結合是(→φ₽shì)靜(jìng)電(diàn)結合,所以不(bù)影(yǐng)‍ 響蛋白(bái)質的(de)生(shēng)物(wù)特性。 ∞÷★膠體(tǐ)金(jīn)除了(le)與蛋白(bái)質結合以外(↑$wài),還(hái)可(kě)以與許多(duō)其它生(shēng)物(wù)大(dà)分(∑∑fēn)子(zǐ)結合,如(rú)SPA、PHA、ConA等。根據膠體(tǐ)金(jīn£♣₹)的(de)一(yī)些(xiē)物(wù)理(lǐ)性狀,如(rú)高(gāoβ' )電(diàn)子(zǐ)密度、顆粒大(dà)小(xiǎo)、形狀及顔色反應,加上(shàng)結合物(wù)的(de)免疫和(hé)生(shēng)物(wù)學特‍>≠§性,因而使膠體(tǐ)金(jīn)廣泛地(dì)應用(yòng)☆€ ®于免疫學、組織學、病理(lǐ)學和(hé)細胞生(shēng)物(wù©←)學等領域。 膠體(tǐ)金(jīn)标記,實質上(shàng)是(shì)蛋白(bái)質等高(™¶gāo)分(fēn)子(zǐ)被吸附到(dào)膠體(tǐ)金(jīn)顆粒表面的(de)包✘↕÷被過程。吸附機(jī)理(lǐ)可(kě)能(nén'₽©≤g)是(shì)膠體(tǐ)金(jīn)顆粒表面負電(diàn)荷,與蛋白(bái)質的(de)正電(diàn)荷₽↓基團因靜(jìng)電(diàn)吸附而形成牢固結合。用(yòng)還γ‍(hái)原法可(kě)以方便地(dì)從(cóng)×φ¶£氯金(jīn)酸制(zhì)備各種不(bù)同粒徑、也(yě)就ε↔(jiù)是(shì)不(bù)同顔色的(de♣​)膠體(tǐ)金(jīn)顆粒。這(zhè)種球形的(de)粒子(zǐ)對(duì)ᣧ蛋白(bái)質有(yǒu)很(hěn)強的(de)吸附功能(néng),可(k ≠≈ě)以與葡萄球菌A蛋白(bái)、免疫球蛋白(bái)、毒素糖蛋白(bái)、酶、抗生(shēng)素、激素、牛血清白(bái)蛋白(bái)多(duō)肽綴合物(wù)等非共價結合,因→‌§而在基礎研究和(hé)臨床實驗中成為(wèi)非常有>←→(yǒu)用(yòng)的(de)工(gōng)具。 δ™→<免疫金(jīn)标記技(jì)術(shù)(Immunogold labelling technique) 主要γ↔←(yào)利用(yòng)了(le)金(jīn)顆粒具有(yǒu)高(gā≈♥€ o)電(diàn)子(zǐ)密度的(de)特性,在金(jīn)标蛋白(bái)結合處,在顯‍↑微(wēi)鏡下(xià)可(kě)見(jiàn)α≥↔黑(hēi)褐色顆粒,當這(zhè)些(xiēα↔ε)标記物(wù)在相(xiàng)應的(de)配體(tǐ)處大(dà)量聚集時(sh£✘★í),肉眼可(kě)見(jiàn)紅(hóng)色或粉紅(hó♥ ng)色斑點,因而用(yòng)于定性或半定量的(de)快(kuài)速免疫檢測方法中,這(zhè)一(yī)反應也(yě)可(kě)₩↑以通(tōng)過銀(yín)顆粒的(de)沉積被放(λδfàng)大(dà),稱之為(wèi)免疫金(jīn)銀(yín)染色。

2功能(néng)編輯

常用(yòng)的(de)免疫膠體(tǐ)金(jīn)檢測技(jì)術(shù): (1)免疫膠體(tǐ)金(jīn)光(gu>₹↓āng)鏡染色法 細胞懸液塗片或組織切片,可'¶₽&(kě)用(yòng)膠體(tǐ)金(jīn)标記的(de)抗體(tǐ)進行(xíng)染色,也(yě)可(α$₩kě)在膠體(tǐ)金(jīn)标記的(de)基礎上(sh★≈àng),以銀(yín)顯影(yǐng)液增強标記,使被​₩✔還(hái)原的(de)銀(yín)原子× ☆σ(zǐ)沉積于已标記的(de)金(jīn)顆粒表面,可(kě)明(míng)顯增強膠體(tǐ)金(♣​∏jīn)标記的(de)敏感性。 (2)免疫膠體(tǐ)金(jīn)電(diàn)鏡染色法 可(kě)用(yòng)膠體(tǐ)金(jīn)标記的(de)抗體(tǐ)或抗抗體(tǐ)與負染病毒樣本或組織超薄切片結合,然後進行(xíng)負染。可(kě)用(yòng)于病毒形态的(de)觀察和(hé)病$★↕毒檢測。 斑點免疫金(jīn)滲濾法 (3)應用(yòng)微(wēi)孔濾膜(如(rú)£&膜)作(zuò)載體(tǐ),先将抗原或抗體(tǐ)點于膜上(shàng),封閉後加待檢樣本,洗滌後用  (yòng)膠體(tǐ)金(jīn)标記的(de)抗體(tǐ)檢測相(xiàng)應的(de)抗原或抗體(tǐ)。 (4©λ)膠體(tǐ)金(jīn)免疫層析法 将特異性的(de)抗原或抗體(tǐ)以條帶狀固定在膜上(shàng),膠體(βπ∞tǐ)金(jīn)标試劑(抗體(tǐ)或單克隆抗體(tǐ))吸附在結合墊上(shàng),當待檢樣本加到(dào)≥₽α試紙(zhǐ)條一(yī)端的(de)樣₩↔÷♥本墊上(shàng)後,通(tōng)過毛細作(zuò)用(yòng)向前移動,溶解結合墊上(shàng)的(de)膠體(tǐ)金(jīn)标記試劑後€∏→相(xiàng)互反應,當移動至固定的(de)抗原或抗體(tǐ)的(deσ≥)區(qū)域時(shí),待檢物(wù)與金(jīn)标試劑的(de)結合物(wù)又(≤σ≠yòu)與之發生(shēng)特異性結合而被截留,聚集在檢測帶上(shàng),可(kě)通(t↕↕ōng)過肉眼觀察到(dào)顯色結果。該法現(xiàn)已發展成為(wèi)診斷試紙(✘β≥zhǐ)條,使用(yòng)十分(fēn)方便。

 

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